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催化①过程的酶是RNA聚合酶 ④过程发生的变化是引物与单链RNA结合 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温 如果RNA单链中A.与U.之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA中,A.与T.之和也占该DNA碱基含量的40%
TaqDNA聚合酶 RNA聚合酶 解旋酶 90 ℃~95 ℃的高温
加入的Taq聚合酶耐高温 不同大小DNA在电场中迁移速率不同 此过程需要DNA连接酶 扩增区域由2个引物来决定
PCR技术的原理是DNA复制 是一酶促反应,需耐高温的解旋酶加DNA聚合酶 一个DNA片段经PCR扩增,可以形成2n个DNA片段(n代表循环次数) PCR利用了DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合
催化①过程的酶是RNA聚合酶 ④过程发生的变化是引物与单链DNA结合 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温 如果RNA单链中A.与U.之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA中,A.与U.之和也占该DNA碱基含量的40%
纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁 用于PCR技术的DNA聚合酶耐高温 一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合
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T4 DNA连接酶 T7 DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶 E. coli DNA聚合酶I E. coli DNA聚合酶II
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需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶 反应过程包括变性→复性→延伸
95℃时DNA的磷酸二酯键断开 引物与模板结合后向5’方向延伸
PCR技术利用了DNA双链复制的原理 催化①过程的酶是RNA聚合酶 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温 ④过程发生的变化是引物与互补DNA链结合
酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链 延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度 DNA聚合酶不能热变性,要用耐高温的聚合酶 DNA解旋酶不能热变性,为了确保模板是单链
酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链 延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度 DNA聚合酶具有耐高温的能力 DNA解旋酶具有耐高温的能力
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PCR技术中的解旋方式与体内DNA复制不相同 PCR技术中所用的DNA聚合酶具有耐高温的特点 PCR技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增 PCR技术需要添加人工合成的引物