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也称基因克隆 只有质粒DNA能被用作载体 需供体DNA 重组DNA转化或转染宿主细胞 重组DNA需进一步纯化、传代和扩增
首先要将突变基因克隆到突变载体 需要使用连接酶封闭缺口 突变位点位于载体上 保真度比重组PCR定点突变要高 含有突变位点的重组载体可转化大肠杆菌体内进行扩增
基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作载体 重组体DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组DNA进行纯化、筛选
含有DNA的CDS序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体 具有噬菌体的特性,能够通过溶菌周期,形成子代噬菌体颗粒 可在体外被色装成噬菌体颗粒,高效转导对噬菌体敏感的大肠杆菌 用于克隆大片段的DNA分子特别有效 能够与同源序列的质粒进行重组
其亚克隆载体序列的随机引物 其亚克隆载体序列的定向引物 其亚克隆载体序列的待测引物 其亚克隆载体序列的通用引物 其亚克隆载体序列的双链引物
载体用来携带目的基因或核酸序列进入受体细胞 载体根据功能不同可分为克隆载体和表达载体 载体不能在受体细胞中自主复制 载体中通常带有某些特定的药物抗性基因 载体中通常有一个由数个单一酶切位点组成的多克隆位点
分子量小、多拷贝、松弛控制型 具有多种常用的限制性内切酶的单切点 能插入较大的外源DNA片段 具有容易操作的检测表 以上都是
可调控的强启动子序列 很强的增强子序列 适当的选择标志 适当的克隆位点 起始密码
载体为SPA SPA具有与IgG的Fc段结合的特性 其原理为抗体致敏的颗粒载体检测抗原 其原理为抗原致敏的颗粒载体检测抗体 SPA具有IgGFc段的特性
常用作克隆载体的噬菌体有 λ—噬菌体和 M13噬菌体 λ噬菌体DNA改造成的载体有λgt系列和EMBL系列 λgt系列适用于插入型载体,用于 cDNA克隆 EMBL系列适用于置换型载体,用于基因组 DNA克隆 M13噬菌体基因间隔区插入了Ecoli的一段调节基因和 LacZ的C端氨基酸编码基因
需供体DNA 只有质粒DNA能被用作载体 也称基因克隆 重组DNA转化或转染宿主细胞 重组DNA需下一步纯化、传代和扩增
分子量小、多拷贝、松弛控制型 具有多种常用的限制性内切酶的单切点 能插入较大的外源DNA片段 具有容易操作的检测表型 以上都是
载体可以用来携带目的基因片段进入受体细胞 根据功能的不同,可以将载体分为克隆载体和表达载体两大类 载体不能在受体细胞中自主复制 载体中通常带有某些特定的药物抗性基因 载体中通常有一个由数个单一酶切位点组成的多克隆位点
含有DNA得CDS序列与质粒复制子得特殊类型得质粒载体 具有噬菌体得特性,能够通过溶菌周期,形成子代噬菌体颗粒 可在体外被色装成噬菌体颗粒,高效转导对噬菌体敏感得大肠杆菌 用于克隆大片段得DNA分子特别有效 能够与同源序列得质粒进行重组
基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作为载体 重组体 DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组 DNA进行纯化.筛选