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引物自身应该存在互补序列 引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 引物的3′端可以被修饰
对于靶序列变异的识别能力较弱 杂交信号较弱 核酸序列较短 特异性较低 可以检测突变点
增加镁离子浓度容易产生正向突变 第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链 第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链 第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增 该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
DNA内切酶 MgC12 dNTP 寡核苷酸引物 模板DNA
TaqDNA聚合酶 dNTP 双链DNA模板 寡核苷酸引物 石蜡油
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3′端可以被修饰
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3'端可以被修饰
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3’-端可以被修饰
寡核苷酸引物突变法 盒式突变 PCR定点突变法 大引物突变法 E易错PCR法
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3'端可以被修饰