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它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA 切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构 识别序列不同，则切割DNA后产生的黏性末端不同 重组DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为Ⅱ类酶
a酶与b酶切断的化学键相同 a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接 
在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 用a酶、b酶和DNA连接酶对该DNA分子反复切割、连接操作，若干循环后， 序列会明显增多
在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 a酶与b酶切断的化学键不同 用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，
序列会明显增多
在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接 a酶与b酶切断的化学键相同 用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后， 序列会明显增多
图中1处能够形成识别序列－G↓GATCC－的概率均为1/2 图中2处能被酶Ⅱ切割开的概率是3/4 该重组DNA分子能够再被限制酶Ⅱ切割开的概率是9/16 该重组DNA分子能够再被限制酶Ⅰ切割开的概率是1
即使只有一种限制酶，因为DNA是线性的，所以也可以迅速准确确定限制片段序列 内切酶在等距离位点切割DNA，同时对于每个生物体的长度是特异的 DNA的线性意味着单限制酶切片段的长度之和等于DNA的总长 内切酶的消化活性是物种特异的 这一技术同时为核苷酸序列提供了广泛信息
“鸟枪法” DNA扩增技术 人工合成基因的方法 用限制性内切酶切割DNA片段
限制酶失活 限制酶的星号活性 有其他限制酶污染 有抑制剂存在 测试DNA中有其他DNA污染
从血液、皮肤或精液可分离出DNA，并分析其从串联重复产生的不同的限制性片段谱 从血液、皮肤或精液分离出DNA，用凝胶电泳分析其片段分布 从血液、皮肤或精液的，RNA 以反转录酶拷贝出其DNA，分析其互补DNA谱 从血液、皮肤或精液分离出DNA，用HLA探针杂交以观察HLA基因谱 从血液、皮肤或精液分离出DNA，再离心分离出卫星DNA作凝胶电泳分析
以上DNA片段是由3种限制酶切割后产生的 用DNA连接酶可以把③⑤连接起来。 限制酶和DNA连接酶作用的部位不同 上述①④是能用DNA连接酶连接起来的两个片段
Northernblot Dotblot Westernblot Southernblot insituhybridization
酶失活 底物DNA不纯，污染有蛋白质 酶切条件不合适 由外切核酸酶污染
切割样本DNA的工具是限制性核酸内切酶 PCR技术可判断亲缘关系，但不能用于基因诊断 利用PCR技术扩增样本DNA所用的酶是Taq酶 鉴定时的DNA探针是用放射性同位素作标记的DNA片段
在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接 a酶与b酶切断的化学键相同 用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后， 序列会明显增多
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