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主要从真核生物中分离纯化出来 能在特定的位点上切割DNA分子 对目的基因和运载体必需用两种特定的限制性内切酶进行切割，产生特定的黏性末 端 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列
主要从真核生物中分离纯化出来 能在特定的位点上切割DNA分子 对目的基因和运载体必需用两种特定的限制性内切酶进行切割，产生特定的黏性末端 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列
目的基因 限制性核酸内切酶 运载体 体细胞 重组DNA RNA聚合酶 限制性核酸内切酶 连接酶 工具酶 目的基因 运载体 受体细胞 模板DNA 信使RNA 质粒 受体细胞
质粒 限制性内切酶 DNA连接酶 提供目的基因的生物 大肠杆菌等 提供目的基因的生物 DNA连接酶 限制性内切酶 质粒 大肠杆菌等 提供目的基因的生物 限制性内切酶 DNA连接酶 质粒 大肠杆菌等 大肠杆菌等 DNA连接酶 限制性内切酶 提供目的基因的生物 质粒A.AB.B C.CD.D
主要从原核生物中分离纯化出来 能在特定的位点上切割DNA分子 对目的基因和运载体必需用两种特定的限制性内切酶进行切割，产生特定的黏性末端 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列
工具酶、目的基因、运载体、受体细胞 重组DNA.RNA聚合酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 模板DNA.信使RNA.质粒、受体细胞 目的基因、限制性核酸内切酶、运载体、受体细胞
限制性核酸内切酶的切口一定是GAATTC碱基序列 基因工程所用的工具酶是限制性核酸内切酶、连接酶和运载体 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列 目的基因就是指重组DNA质粒
载体和目的基因的分离 限制性内切酶的切割，并把载体和目的基因合成重组 DNA重组体的转化表达 DNA重组体的扩增、筛选与鉴定
同种限制性核酸内切酶 两种限制性核酸内切酶 同种DNA连接酶 两种DNA连接酶
标志补救筛选 插入表达筛选 抗性筛选 限制性内切酶酶切图谱分析 核酸分子杂交筛选
限制性核酸内切酶能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将相应碱基之间的键断开，从而使DNA分子切断 DNA连接酶、限制性内切酶及载体是构建重组质粒必需的工具酶 下面是两种限制性核酸内切酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端）：限制酶1：—↓GATC— ，限制酶2：—GGATC↓C— ，这两种限制酶剪出的黏性末端是不相同的 在人工合成目的基因的过程中，根据蛋白质中氨基酸序列合成的目的基因碱基序列及控制的性状与生物体内原有的基因及性状是相同的。
目的基因限制性内切酶运载体体细胞 重组DNARNA聚合酶限制性内切酶连接酶 工具酶目的基因运载体受体细胞 模板DNA信使RNA质粒受体细胞
目的基因限制性内切酶运载体体细胞 重组DNARNA聚合酶内切酶连接酶 模板DNA信使RNA质粒受体细胞 工具酶目的基因运载体受体细胞
目的基因 限制性内切酶 载体 受体细胞 重组DNA RNA聚合酶 内切酶 连接酶 模板DNA 信使RNA 质粒 受体细胞 工具酶 目的基因 载体 受体细胞
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