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首先要将突变基因克隆到突变载体 需要使用连接酶封闭缺口 突变位点位于载体上 保真度比重组PCR定点突变要高 含有突变位点的重组载体可转化大肠杆菌体内进行扩增
点突变可以利用DNA探针进行检测 点突变引起的变异类型属于基因突变 应用点突变技术可培育具有新性状的生物，形成新物种 应用点突变技术可以研究蛋白质结构与功能的关系
增加镁离子浓度容易产生正向突变 第一轮PCR扩增的是不同DNA模版链 第二轮PCR扩增的是同一DNA模板链 第三轮PCR需要两种外侧寡核苷酸引物进行扩增 该方法产生的DNA片段需要经过测序来验证是否发生其他突变
只能在DNA片段的特定部位产生突变 不需要测序确定突变结果 重组PCR定点突变法需要4种扩增，3轮PCR反应 大引物法需要3种扩增引物，3轮PCR反应 重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
定向进化的突变是随机的，不确定的 定向进化的突变位点的数目是不确定的，但突变的个数可预知 定向进化的效应是可预知的 定点突变的突变位点是不确定的 定点进化的突变效应一定是已知的
淋巴细胞杂交瘤技术 酵母双杂交技术 酵母单杂交技术 基因定点突变技术
寡核苷酸引物突变法 盒式突变 PCR定点突变法 大引物突变法 E易错PCR法
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