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同聚物加尾连接 人工接头连接 平端连接 粘性末端连接 非粘性末端连接
DNA聚合酶 RNA聚合酶 引物酶 逆转录酶 末端转移酶
同聚物加尾连接 人工接头连接 平端连接 黏性末端连接 非黏性末端连接
基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作载体 重组体DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组DNA进行纯化、筛选
黏性末端连接 平端连接 黏性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
粘性末端连接 平末端连接 平末端与粘端直接相连 同聚物加尾连接 人工接头连接
黏性末端连接 平端连接 黏性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
b、c分别表示用DNA限制酶和连接酶的处理 切割目的基因与切割运载体(如质粒)时必需用同种限制酶 切割目的基因或运载体时一般只用一种限制酶 构建的基因表达载体只要求含有目的基因
同聚物加尾连接 人工接头连接 粘性末端连接 缺口末端连接 平端连接
同聚物加尾连接 人工接头连接 粘性末端连接 缺口末端连接 平端连接
限制酶只用于切割获取目的基因 载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA连接酶 带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测
同聚物加尾连接 人工接头连接 粘性末端连接 缺口末端连接 平端连接
同聚物加尾连接 人工接头连接 平端连接 黏性末端连接
逆转录酶 多聚核苷酸激酶 引物酶 RNA聚合酶 末端转移酶
其核心是利用末端转移酶的功能,将载体和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。 不易自身环化。 连接效率高 适用于CDNA克隆 可能会产生某种限制酶切位点。
RNA聚合酶 末端转移酶 碱性磷酸酶 反转录酶 核苷酸酶
粘性末端与粘性末端的连接 平端与平端的连接 粘性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作为载体 重组体 DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组 DNA进行纯化.筛选