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将目的基因从染色体上切割出来 识别并切割特定的DNA核苷酸序列 将目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞
该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G.和A.之间 用此酶切割含有目的基因的片段时，必须用相应的限制酶切割运载体，以产生与目的基因相同的黏性末端 要把目的基因与运载体“缝合”起来，要用到基因工程的另一个工具——DNA聚合酶 限制酶切割DNA分子时，是破坏了同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的化学键而不是两条链上互补配对的碱基之间的氢键
用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端 将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 将重组DNA导入到受体细胞进行扩增
图中甲代表的是基因表达载体，乙可代表番茄细胞 可用PstI.酶和SmaI.酶切割鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接 若用PstI.酶和SmaI.酶切割质粒产生的DNA片段有3种 图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化和再分化过程
b、c分别表示用DNA限制酶和连接酶的处理 切割目的基因与切割运载体（如质粒）时必需用同种限制酶 切割目的基因或运载体时一般只用一种限制酶 构建的基因表达载体只要求含有目的基因
该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间 用此酶切割含有目的基因的片段时，必须用相应的限制酶切割运载体，以产生与目的基因相同的黏性末端 要把目的基因与运载体“缝合”起来，要用到基因工程的另一个工具——DNA聚合酶 限制酶切割DNA分子时，是破坏了同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的化学键而不是两条链上互补配对的碱基之间的氢键
将目的基因从染色体上切割出来 识别并切割特定的DNA核苷酸序列 将目的基因与载体结合 将目的基因导入受体细胞
同一限制性内切核酸酶切割的粘性末端 不同一限制性内切核酸酶切割的配伍末端 不同一限制性内切核酸酶切割的不同类型的粘性末端 同一限制性内切核酸酶切割的平端 不同一限制性内切核酸酶切割的平端
b、c分别表示用DNA限制酶和连接酶的处理 切割目的基因与切割运载体（如质粒）时必需用同种限制酶 切割目的基因或运载体时一般只用一种限制酶 构建的基因表达载体只要求含有目的基因
该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G.和A.之间 用此酶切割含有目的基因的片段时，必须用相应的限制酶切割运载体，以产生与目的基因相同的黏性末端 要把目的基因与运载体“缝合”起来，要用到基因工程的另一个工具——DNA聚合酶 限制酶切割DNA分子时，是破坏了同一条链上相邻脱氧核苷酸之间的化学键而不是两条链上互补配对的碱基之间的氢键
用一定的限制性内切酶切割质粒露出黏性末端 用同种限制性内切酶切断目的基因露出黏性末端 将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 将重组DNA引入受体细胞中进行扩增
同聚物加尾连接 人工接头连接 平端连接 黏性末端连接
用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端 将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
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