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通用引物-PCR方法(generalprimer-media-tedPCR,GP-PCR) 多重PCR(multiplexPCR) 套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction,NP-PCR) AP-PCR方法(arbitrarilyprimedPCR) 原位PCR技术(insituPCR,ISP(R)
核苷酸序列呈对数方式增加 PCR技术需要合成引物 DNA变性解链的温度为70—75℃ 所需要的酶为限制酶
多重PCR是在一次反应中加入多种引物,同时扩增一份DNA样品中的不同序列 利用不对称PCR,可以获得大量单链DNA 利用反向PCR,可以扩增已知序列区间以外的未知序列 筑巢法PCR可以大大提高PCR的效率,但PCR特异性降低 共享引物PCR是利用3条引物来扩增两种不同的DNA序列,这种PCR常用于细菌学鉴定,确定同一种细菌的不同种类
通用引物-PCR方法(general primermediated PCR,CJP-PCR) 多重PCR(multiplexPCR) 套式PCR(nestcdprimers-polymerasc chain reaction,NP-PCR) AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR) 原位PCR技术(in situPCR,ISPCR)
只能在DNA片段的特定部位产生突变 不需要测序确定突变结果 重组PCR定点突变法需要4种扩增,3轮PCR反应 大引物法需要3种扩增引物,3轮PCR反应 重组PCR定点突变法操作较大引物法简单
AP-PCR方法(arbitrarily primed PCR) 通用引物-PCR方法(general primer-mediated PCR,GP-PCR) 套式PCR(nested primers-polymerase chainreaction,NP-PCR) 多重PCR(multiplex PCR) 原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)
是PCR过程中与模板DNA部分序列互补的核苷酸序列 常根据需要扩增的目标DNA片段的碱基序列用化学合成的方法获得 PCR过程中一般需要一种引物或两种引物 引物的3'端具有游离的﹣OH
通用引物-PCR方法(generalprimer-media-tedPCR,GP-PCR) 多重PCR(multiplexPCR) 套式PCR(nestedprimers-polymerasechainreaction,NP-PCR) AP-PCR方法(arbitrarilyprimedPCR) 原位PCR技术(insituPCR,ISPCR)
套式PCR(Nested PCR) 多重PCR(Multiplex PCR) 反转录PCR(RT-PCR) 任意引物PCR(Arbitrarily Primed PCR) 限制性片段长度多态性(RFLP)分析
PCR技术对扩增的目的基因序列是完全未知的 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶 该技术需要一对特异性的引物,要求一对引物的序列是互补的 该技术应用体内DNA双链复制原理,也需要模板、原料、能量、酶等条件
通用引物-PCR方法(general primermediated PCR,CJP-PCR) 多重PCR(multiplex PCR) 套式PCR(nestcd primers-polymerasc chain reaction,NP-PCR) AP-PCR方法(arbitrarily primcdPCR) 原位PCR技术(in situ PCR,ISPCR)
PCR 需要 DNA 聚合酶 PCR 一般需要在高温下进行 PCR 需要一段 RNA 引物 PCR 需要 DNA 模板
可用于扩增DNA 不需要引物 只需要单链DNA为模板 不需要变性 与T值无关
不需要引物 只需要单链DNA为模板 可用于扩增DNA 不需要变性 与T值无关