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以双脱氧底物取代正常底物 碱基与特殊染料间不同的相互作用 一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止 反应是DNA特异的,RNA不会干扰
不需要加入2',3'-双脱氧核苷三磷酸底物 不需要DNA聚合酶的参与 不需要进行核素标记 所测序列来自原DNA分子本身 所测序列来自酶促反应的拷贝
无须酶促反应的测序技术 4种酶的级联反应测序技术 3种酶的级联反应测序技术 2种酶的级联反应测序技术 1种酶的级联反应测序技术
不需要加入2',3'-双脱氧核苷三磷酸底物 不需要DNA聚合酶的参与 不需要进行同位素标记 所测序列来自酶促反应的拷贝 所测序列来自原DNA分子本身
Sanger Pauling Jacob Monod
单链DNA 双链DNA 单链RNA 双链RNA 任意核酸
待测模板 测序引物 RNA聚合酶 标记的dNTP 凝胶电泳
不需要加入2',3'—双脱氧核苷三磷酸底物 不需要DNA聚合酶的参与 不需要进行核素标记 所测序列来自原DNA分子本身 所测序列来自酶促反应的拷贝
碱基与特殊染料间不同的相互作用 一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止 限制性位点与DNA末端标记的相关性 可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序 反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支
Sanger Fodor Pauling Crick
待测模板 测序引物 RNA聚合酶 标记的dNTP 凝胶电泳
RT-PCR DNA的化学修饰 四色荧光的加入 双脱氧核苷酸终止链的延长
单链DNA 双链DNA 单链RNA 双链RNA 任意核酸