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融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
变性过程中破坏了DNA分子内碱基对之间的氢键 退火过程中引物与DNA模板链结合遵循碱基互补配对原则 延伸过程中需要DNA聚合酶、四种核糖核苷酸、ATP PCR过程中不需要解旋酶
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
DNA中含GC碱基对多则Tm高 分子中磷酸二酯键断裂 变性后,有增色效应 两条多核苷酸链间氢键断开 不同DNA分子的变性温度不同
变性过程中破坏的是DNA分子的空间结构,这种变性是可逆的 复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸 PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
粘度降低 紫外光吸收值降低 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性 50%双链结构被解开时的温度称为DNA的Tm DNA分子中GC含量越高Tm值越大
50%双链结构被解开时的温度称为DNA的Tm 紫外光吸收值降低 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性 黏度降低 DNA分子中GC含量越高Tm值越大
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化AA260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
DNA中含GC碱基对多则Tm高 分子中磷酸二酯键断裂 变性后,有增色效应 两条多核苷酸链间氢键断开 不同DNA分子的变性温度不同
PCR过程中需要引物,是为了使DNA双链分开 PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步 PCR过程中DNA合成方向是3’到5’ PCR过程中边解旋边复制
热变性的DNA维持原温度即可复性 热变性的DNA在降温过程中可复性 热变性的DNA经加热处理后即可复性 热变性的DNA经酸处理后即可复性 热变性的DNA经酶切后即可复性
两条多核苷酸链间氢键断裂 分子中磷酸二酯键断裂 不同DNA分子的变性温度不同 DNA中含GC碱基对多则Tm值高
解旋酶,低温变性 解旋酶,高温变性 聚合酶,高温变性 解旋酶,高温复性
碱基间的磷酸二酯键断裂 在260nm处的光吸收降低 对于一种均一DNA,其变性温度范围不变 融解温度因鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对的含量而异
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
碱基间的磷酸二酯键断裂 在260mm处的光吸收降低 对于一种均一DNA,其变性温度范围不变 融解温度因鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对的含量而异
变性过程中A260的光吸收增加 GC%含量相同的情况下,碱基排列顺序对Tm值具有明显影响 降低DNA溶液中的盐离子浓度,可以提高Tm值 双链DNA变性后,沉降速度加快
两条多核苷酸链间氢键断裂 分子中磷酸二酯键断裂 不同DNA分子的变性温度不同 DNA中含GC碱基对多则Tm值高