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其他酶和物质干扰 酶的污染 非酶反应 分析容器的污染 沉淀形成
可测定产物生成量 可测定底物消耗量 需最适pH 需最适温度 与底物浓度无关
尿素的浓度取决于机体氮的分解代谢和肾脏的排泄能力 血清肌酐和尿素浓度可反映肾小球滤过功能 血尿素测定比血肌酐测定更能准确地反映肾小球滤过功能 尿素酶法测定尿素反应专一,特异性强 酶耦联法测定肌酐特异性高,但价格昂贵
ICC染色最为常用的酶 特异底物为AS-MX 在酶反应部位呈棕褐色 常用戊二醛作为耦联剂 最适pH5~5.5
尿素的浓度取决于机体氮的分解代谢和肾脏的排泄能力 血清肌酐和尿素浓度可反映肾小球滤过功能 血尿素测定比血肌酐测定更能准确地反映肾小球滤过功能 尿素酶法测定尿素反应专一,特异性强 酶偶联法测定肌酐特异性高,但价格昂贵
常用戊二醛作为耦联剂 ICC染色最为常用的酶 在酶反应部位呈棕褐色 特异底物为AS-MX 最适pH5~5.5
其他酶和物质干扰 酶的污染 非酶反应 分析容器的污染 沉淀形成
ν=V max [S] /(Km + [S]) 反应速度为最大反应速度一半时,Km =[S] Km对选择底物浓度有重大意义 Km作为酶的一种特征常数,与酶的性质与浓度有关
往往利用一个以上的工具酶 测定延滞期越短越好 指示酶的反应必须是一级反应 一般指示酶的Km值都很大 指示酶的用量要适量
是测定酶的活性浓度 是测定酶催化反应的速度 一般不直接测酶蛋白的含量 测定酶活性浓度时要选择好各种条件 任何情况下酶促反应速度与酶浓度成正比例
常使用比色法 先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间 不必停止酶反应 加入试剂进行呈色反应 历史上将其命名为取样法
尿素的浓度取决于机体氮的分解代谢和肾脏的排泄能力 血清肌酐和尿素浓度可反映肾小球滤过功能 血尿素测定比血肌酐测定更能准确地反映肾小球滤过功能 尿素酶法测定尿素反应专一,特异性强 酶耦联法测定肌酐特异性高,但价格昂贵
可测定产物生成量 不可测定底物消耗量 与底物浓度有关 需最适温度 需最适酸碱度
水分减少时,酶的活性下降,然而酶和基质浓度同时增加,因此反应速度也随之增加 干制品水分降到1%以下时,酶的活性才会完全消失 为了控制干制品中酶的活性,可以在干制之前对原料进行湿热或化学钝化处理 Aw=0-0.3时,酶的水解反应还在进行
自变量是不同的温度梯度 控制不变的量有PH、底物浓度、酶浓度、反应时间等 可以通过测定滤出的果汁的体积来判断果胶酶的最适温度 pH过高时,果胶酶活性变小,但是不会失活
往往利用一个以上的工具酶 测定延滞期越短越好 指示酶的反应必须是一级反应 一般指示酶的Km值都很大 指示酶的用量要适量
往往利用一个以上的工具酶 测定延滞期越短越好 指示酶的反应必须是一级反应 一般指示酶的Km值都很大 指示酶的用量要适量
可测定产物生成量 不可测定底物消耗量 与底物浓度有关 需最适温度 需最适酸碱度