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融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
DNA都是右手螺旋 温度变化时DNA从右手螺旋变成左手螺旋 改变离子强度与温度对DNA构型有影响 不同构象的DNA在功能上有差异
碱基间的磷酸二酯键断裂 黏度增高 一种三股螺旋的形成 融解温度因G-C对的含量而异 在260nm处的光吸收降低
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化AA260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
零下15℃ 零下18℃ 20℃±5℃ 20℃±3℃
融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
在融解温度(Tm) 比Tm高25℃的温度 比Tm低25℃的温度 加热后将其迅速冷却至4℃以下
碱基间的磷酸二酯键断裂 在260nm处的光吸收降低 对于一种均一DNA,其变性温度范围不变 融解温度因鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对的含量而异
50%的DNA双链被打开时的温度 在解链过程中紫外吸光度的变化△A260达到最大变化值的一半时所对应的温度 DNA的Tm值与其DNA长短有关 DNA的Tm值与其碱基的GC含量相关 DNA溶液中离子强度越低,Tm值越高
融解温度Tm 增色效应 减色效应 DNA复性 核酸分子杂交
A达到最大值时的温度 A达到最大值的50%时的温度 DNA开始解链时所需要的温度 DNA完全解链时所需要的温度 A达到最大值的50%时的温度
碱基间的磷酸二酯键断裂 在260mm处的光吸收降低 对于一种均一DNA,其变性温度范围不变 融解温度因鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对的含量而异
双螺旋DNA达到完全变性时的温度 双螺旋DNA达到开始变性时的温度 双螺旋DNA结构失去1/2时的温度 双螺旋DNA结构失去1/4时的温度A