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引物自身应该存在互补序列 引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 引物的3′端可以被修饰
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3＇端可以被修饰
先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA 先导链的引物是RNA，后随链的引物是DNA 先导链和后随链的引物都是RNA 先导链和后随链的引物都是DNA
引物内部不能存在连续的互补序列，防止产生二聚体和发夹结构 引物中G+C的含量占45%~55% 引物的长度为18~25 bp 引物的3′ 端可以带有生物素,荧光素或酶切位点 两条引物的Tm值应该尽量相近
引物酶是一种特殊的DNA聚合酶 引物酶是一种特殊的RNA聚合酶 催化合成的引物与DNA模板是互补的 催化合成一小段引物 核苷酸的合成方向是5′→3′
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3′端可以被修饰
代表 A.引物 模板 引物的3'末端 引物的5'末端（2）图中D.代表 A.引物的3’末端 B.模板的3’末端 C.引物的5’末端 D.模板的5’末端（3）图中E.代表 A.引物的3’末端 B.模板的3’末端 C.引物的5’末端 D.模板的5’末端
待扩增片段的序列是已知的，在片段两侧确定引物顺序 引物长度一般为15～30个核苷酸，但也可多至50个左右 引物中的碱基应随机分布，G＋C的含量宜在45%～55% 引物内部不应形成二级结构，避免在链内存在互补的序列 可以在引物的3′末端引入特定的酶切位点
引物酶是一种特殊的DNA聚合酶 引物酶是一种特殊的RNA聚合酶 催化合成的引物与DNA模板是互补的 催化合成一小段引物 核苷酸的合成方向是5ˊ→3ˊ
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3’-端可以被修饰
引物与模板的长度 引物与模板的GC含量 模板的长度和GC含量 引物的长度和GC含量 模板的长度与引物的GC含量
一对引物 半对引物 两对引物 两对半引物 多对引物
引物是一条人工合成的寡核苷酸片段 引物序列与模板DNA的待扩增区互补 在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物 引物自身应该存在互补序列 引物的3'端可以被修饰
在引物终浓度为0.2～1μmol/L的范围内，PCR的产物量基本相同 引物浓度过高会降低靶序列的扩增量 引物只与靶序列的相应部分结合 引物浓度过高会促进引物错误引导非特异产物合成 引物浓度过高会增加引物二聚体的形成
引物1与引物2 引物3与引物4
引物2与引物3 引物1与引物4
先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA 先导链的引物RNA，后随链的引物是DNA 先导链和后随链的引物都是RNA 先导链和后随链的引物都是DNA
引物的长度为18～25bp 引物内部不能存在连续的互补序列，防止产生二聚体和发夹结构 引物中G+C的含量占45%～55% 引物的3′端可以带有生物素、荧光素或酶切位点 两条引物的Tm值应该尽量相近
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