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因含有脂肪族核苷酸 因含有色氨酸和酪氨酸 吸收峰波长为280nm 吸光度与蛋白质含量成正比 可用于蛋白质的定量测定
BCG法测定清蛋白的特异性高 双缩脲不与氨基酸和二肽发生反应 凯氏定氮法是公认的蛋白质测定参考方法 酚试剂法适合测定单一蛋白质,如组织中某一蛋白的抽提物 直接紫外吸收法测定蛋白质的吸收峰为280nm
吸收峰波长为260nm 因含有色氨酸和酪氨酸 吸收峰波长为280nm 吸光度与蛋白质含量成正比 可用于蛋白质的定量测定
280nm 215nm 540nm 340nm 650nm
HiCN法为目前国际统一标准方法 ,但它也存在不足之处 ,最大缺点是 KCN有毒,SHb转化问题也未解决。 AHD575法试剂简易,呈色稳定,反应产物最大吸收峰在 540nm,可用氯化血红素作标准品。 叠氮高铁血红蛋白 (HiN3)测定法与 HiCN法两法系统误差极小 ,相关性极佳,HiN3最大吸收峰 542nm且峰较尖锐。 沙利法由于误差较大 ,现已淘汰。
吸收峰波长为260nm 因含有色氨酸和酪氨酸 吸收峰波长为280hm 吸光度与蛋白质含量成正比 可用于蛋白质的定量测定
精氨酸和脯氨酸 甘氨酸和苯丙氨酸 色氨酸和酪氨酸 亮氨酸和异亮氨酸 甲硫氨酸和门冬氨酸
最大吸收峰向长波方向移动 最大吸收峰向短波方向移动 最大吸收峰波长不移动,但峰值降低 最大吸收峰波长不移动,但峰值增大
在TE缓冲液中,纯DNA的A260/A280比值为1.8 可通过A260和A280的比值判断有无蛋白质的污染 在TE缓冲液中,纯RNA的A260/A280比值为2.0 A260/A280比值为1.8的DNA表示无蛋白质污染 蛋白质在280nm的吸收峰与酚在270nm的吸收峰可以鉴定主要是蛋白质还是酚的污染
凯氏定氮法 酚试剂法 茚三酮反应 双缩脲法 280nm紫外吸收
在TE缓冲液中,纯RNA的A260/A280比值为2.0 在TE缓冲液中,纯DNA的A260/A280比值为1.8 可通过A260和A28的比值判断有无蛋白质的污染 A260/A280比值为1.8的DNA表示无蛋白质污染 蛋白质在280nm的吸收峰与酚在270nm的吸收峰可以鉴定主要是蛋白质还是酚的污染
HiCN法为目前国际统一标准方法,但它也存在不足之处,最大缺点是KCN有毒,SHb转化问题也未解决 AHD575法试剂简易,呈色稳定,反应产物最大吸收峰在540nm,可用氯化血红素作标准品 叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法与HiCN法两法系统误差极小,相关性极佳,HiN3最大吸收峰542nm且峰较尖锐 沙利法由于误差较大,现已淘汰