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重组的目的基因或DNA片段可以来源基因组DNA、cDNA和人工合成的DNA片段 载体最常见的是质粒、噬菌体和逆转录病毒 DNA重组本质上是一个酶促化学反应 从理论上而言,重组反应的最佳温度为25℃ DNA重组的方法有粘端连接法和平端连接法
基因诊断 基因治疗 转基因和基因敲除 单克隆抗体制备 基因工程药物,疫苗和抗体
一种限制性核酸内切酶可以在DNA的任何部位切割 DNA连接酶和运载体是构建重组质粒必需的工具酶 DNA连接酶在连接DNA片段时一般不具特异性 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器
使DNA片段与载体结合 坚决重组DNA片段 催化质粒与噬菌体的链接 获得较小的DNA片段 扩增特定DNA序列
制备目的基因DNA片段 将目的基因与载体相连 将重组DNA导入受体细胞 筛选和鉴定DNA重组体 去除载体
运用了RNA病毒容易突变的特点 运用基因工程手段,使用质粒作载体 重组疫苗携带了HIV病毒的有关信息 重组疫苗起到了抗原的作用
催化质粒与噬菌体的连接 获得较小的DNA片段 扩增特定DNA序列 使DNA片段与载体结合 鉴定重组DNA片段
载体最常见的是质粒,噬菌体和逆转录病毒 DNA重组本质上是一个酶促化学反应 重组的目的基因或DNA片段可以来源基因组DNA,cDNA和人工合成的DNA片段 从理论上而言,重组反应的最佳温度为25℃ DNA重组的方法有粘端连接法和平端连接法
DNA连接酶 RNA聚合酶 DNA聚合酶 限制性内切酶
组蛋白基因 rDNA 线粒体DNA 免疫球蛋白基因 珠蛋白基因中的发现
②和③交替排列,构成了DNA分子的基本骨架 当DNA复制时,④的形成需要DNA连接酶 如果该片段复制两次,则至少需游离的⑥共8个 ⑨在DNA中的特定排列顺序可代表遗传信息
使DNA片段与载体结合 坚定重组DNA片段 催化质粒与噬菌体的链接 获得较小的DNA片段 扩增特定DNA序列
基因诊断 基因治疗 转基因和基因敲除 单克隆抗体制备 基因工程药物、疫苗和抗体