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转化是受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组,是受体菌的性状发生变异的过程 转导是以噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到受体菌内,导致受体菌基因改变的过程 接合是受体菌和供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。 接合主要见于革兰阴性菌 原生质体融合是噬菌体的DNA与细菌染色体重组,是宿主菌遗传结构发生改变而引起的遗传型变异
转化,是受体菌直接摄取供体菌游离的 DNA片段,重组后而获得新性状的过程 转导,是由温和噬菌体为载体,使供体菌遗传物质转移到受体菌的过程 接合,是无性菌毛的F-菌(受体菌),通过与与性菌毛的F+菌(供体菌)接触形成接台桥,从而获得F+菌遗传物质的过程 溶原性转换,是前噬菌体的DNA与细菌染色体DNA重组,而使溶原性细菌获得新特性的过程 基因重组,是外源性DNA通过以毒性噬菌体为载体转移到受体菌,改变了受体菌性状的过程
目的基因的获取 PCR反应 克隆载体的构建 目的基因与载体的连接 重组体分子导入受体菌
转化,是受体菌直接摄取供体菌游离的 DNA片段,重组后而获得新性状的过程 转导,是由温和噬菌体为载体,使供体菌遗传物质转移到受体菌的过程 接合,是无性菌毛的F-菌(受体菌),通过与与性菌毛的F+菌(供体菌)接触形成接台桥,从而获得F+菌遗传物质的过程 溶原性转换,是前噬菌体的DNA与细菌染色体DNA重组,而使溶原性细菌获得新特性的过程 基因重组,是外源性DNA通过以毒性噬菌体为载体转移到受体菌,改变了受体菌性状的过程
细菌直接摄取供体DNA 细菌以噬菌体为载体摄取供体DNA 细菌以噬菌体为载体摄取供体RNA 细菌接受亲缘关系近的细菌DNA 通过性菌毛将所带的F质粒或遗传物质转移到受体菌的过程
天然质粒都含有标记基因和限制酶识别位点,故常作为基因工程的载体 噬菌体作为基因工程载体可以将重组DNA导入到动物受体细胞而获得转基因动物 农杆菌可将以其Ti质粒为载体的重组质粒导入植物细胞以获得相关转基因植物 采用乳腺细胞为目的基因的受体细胞,可获得乳汁中含有相应的产物的转基因动物
核酸杂交 RNA逆转录成DNA 重组质粒导入受体菌 噬菌体DNA直接导入受体菌 DNA转录成RNA
目的基因的获取 外源基因和载体连接 将重组DNA导入受体菌 筛选出含有目的基因的转化菌 常用到DNA解链酶
目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体菌 目的基因的检测与鉴定
基因转移的物理方法有显微注射法、电穿孔法和脂质体法等 基因转移化学法是利用磷酸钙等试剂使细胞膜透性变大,将外源基因导入细胞 基因转移的同源重组法是利用同源DNA片段的交换,将外源基因导入受体细胞 基因转移是将外源目的基因导入靶细胞的过程 基因转移的病毒介导转移法是利用DNA病毒为载体将目的基因导入靶细胞
基因载体的选择与构建 外源基因与载体的拼接 重组DNA分子导入受体细胞 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 表达目的基因编码的蛋白质
细菌通过性菌毛将遗传物质从供体菌转给受体菌 内源性DNA释放到菌体外的过程 外源性质粒导入细菌的过程 以温和噬菌体为载体,将供体菌DNA转移到受体菌内 两种细菌失去细胞壁后彼此融合
遗传物质通过性菌毛在细菌之间发生转移的过程 内源性DNA释放到菌体外的过程 外源性质粒导入细菌的过程 外源DNA以温和噬菌体为载体转移到受体菌内的过程 外源DNA以溶菌性噬菌体为载体转移到受体菌内的过程
目的基因的获取 克隆载体的改建 目的DNA与载体的拼接 将重组分子导入受体菌 重组DNA分子转化受体菌的筛选