根据米一曼方程，理论上酶测定时的底物浓度最好为Km的（）.

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Km值等于酶促反应速率为最大速率一半时的底物浓度 Km值可用来表示酶对底物的亲和力 Km值愈小，酶对底物的亲和力愈大 Km值与酶的结构、底物和反应环境（如温度、pH、离子强度）有关 Km与酶的浓度有关

90%～95% 85%～90% 80%～85% 75%～80% 70%～75%

5倍 1~2倍 10~20倍 30倍 100倍以上

1～2倍 10～20倍 100～200倍 1000～2000倍 10000～20000倍

Km值只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关 Km值越小，表示酶与底物的亲和力越小假如一个酶有几种底物，Km值最大的底物大都是该酶的最适底物或自然底物在酶的浓度不变时，对于特定底物而言，底物浓度越高，Vmax越大当V=Vmax时，Km=[S]

Km值只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关 Km值越小，表示酶与底物的亲和力越小若一个酶有几种底物，Km值最大的底物大都是该酶的最适底物或者天然底物在酶的浓度不变时，对于特定底物而言，底物浓度越高，Vmax越大 v＝Vmax时，Km＝[S]

10～20倍 5倍 1～2倍 30倍 100倍以上

1/10 1倍 2~9倍 10~20倍 20~100倍

10～20倍 5倍 1～2倍 30倍 100倍以上

0.5倍 1.0倍 2～5倍 10～20倍 100倍以上

ν=V_max [S] /（Km + [S]）反应速度为最大反应速度一半时，Km =[S] Km对选择底物浓度有重大意义 Km作为酶的一种特征常数，与酶的性质与浓度有关

0.1倍 1.0倍 1.0～5倍 10～20倍 50～100倍　

酶促反应的初速率为最大速率Vmax75%所需的底物浓度酶促反应的初速率为最大速率Vmax50%所需的底物浓度酶促反应的初速率为最大速率Vmax25%所需的底物浓度酶促反应的初速率为最大速率Vmax100%所需的底物浓度酶促反应的初速率为最大速率Vmax10%所需的底物浓度

通过Km的测定可鉴定酶的最适底物是引起最大反应速度的底物浓度是反映酶催化能力的一个指标是酶和底物的反应平衡常数

在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要以底物的种类和浓度最为重要在多种底物中，Km最大的底物往往是此酶的生理底物米氏方程在选择酶测定底物浓度有着重要的指导作用 pH影响酶的稳定

0.1倍 1.0倍 1.0～5倍 10～20倍 50～100倍

当底物浓度很高时，反应的产物与反应时间之间不成直线关系反应速度与底物浓度应一直成直线关系当底物浓度很高时，反应速度等于Km 当反应速度为最大速度一半时，底物浓度等于Km