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核酸的分子杂交 核酸的变性 最适温度 核酸的复性 核酸探针
分子杂交中必须形成双链如DNA-DNA、DNKA-RNA、RNA-RNA等 分子杂交可用于鉴定DNA或RNA 分子杂交的探针需用同位素或非同位素标记 分子杂交中需要限制性内切酶 分子杂交中往往不需要将标记好的探针变性
cRNA探针 cDNA探针 DNA探针 胶体金探针 抗体探针
是双链分子 在杂交前变性 在杂交后变性 加入引物 加入poly
cRNA探针和寡核甘酸探针 cDNA探针 DNA探针 胶体金探针 抗体探针
不同的核酸链经变性处理,它们之间形成局部的双链 一小段核苷酸聚合体的单链,用放射性核素或生物素来标记其末端或全链 运输氨基酸 单股DNA恢复成双股DNA 50%双链DNA变性时的温度
标准标记之前,将模板加热完全变性 标准标记之前,不将模板DNA加热变性 标准标记之前,模板加热可做可不做 标准标记之前,将模板进行碱变性处理 标准标记之前,将模板进行SDS处理
热变性的DNA维持原温度即可复性 热变性的DNA在降温过程中可复性 热变性的DNA经加热处理后即可复性 热变性的DNA经酸处理后即可复性 热变性的DNA经酶切后即可复性
使DNA探针及细胞内靶DNA变性 使细胞内靶DNA不变性 保持细胞内靶DNA的双链结构 使细胞内靶DNA不丢失 使DNA探针不变性
cRNA探针和寡核苷酸探针 cDNA探针 DNA探针 胶体金探针 抗体探针
双链DNA、单链DNA、RNA都是可以标记的 不需用DNA酶Ⅰ预处理 反应时可用Klenow酶 反应时可用DNA聚合酶Ⅰ
是双链分子 在杂交前变性 在杂交后变性 加入引物 加入poly(A)
分子杂交中必须形成双链如DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA等 分子杂交可用于鉴定DNA或RNA 分子杂交的探针需用同位素或非同位素标记 分子杂交中需要限制性内切酶 分子杂交中往往不需要将标记好的探针变性
定期X线胸部检查,以尽早发现病变 服用治疗矽肺的药物 进行体内排尘处理 不需要进行任何处理 定期查肝功能
实时PCR技术不需要探针 用于核酸分子杂交 用于DNA印迹或RNA印迹 探针序列已知,可通过对探针的检测来判断核酸样品的相关信息 探针的标记是为了方便后续的检测