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重组的目的基因或DNA片段可以来源基因组DNA、cDNA和人工合成的DNA片段 载体最常见的是质粒、噬菌体和逆转录病毒 DNA重组本质上是一个酶促化学反应 从理论上而言，重组反应的最佳温度为25℃ DNA重组的方法有粘端连接法和平端连接法
黏性末端连接 平端连接 黏性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
选择载体和获取目的基因 目的基因与载体酶切后连接 重组DNA导入受体细胞 筛选阳性克隆 分,切,接,转,筛
DNA聚合酶和DNA连接酶 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 逆转录酶和RNA聚合酶 DNA连接酶和DNA酶
DNA复制 DNA重组 DNA断裂和修饰 制备重组DNA DNA修复
将重组DNA导入受体细胞 将外源DNA与载体连接 培养细胞以扩增重组DNA 选出含有重组体的克隆
DNA复制 DNA修复 DNA断裂和修饰 制备重组 DNA DNA复制、修复及重组
黏性末端连接 平端连接 黏性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
催化质粒与噬菌体的连接 获得较小的DNA片段 扩增特定DNA序列 使DNA片段与载体结合 鉴定重组DNA片段
平头末端连接 DNA连接子技术 黏性末端连接 黏性末端与平头末端连接 DNA适配子技术
载体最常见的是质粒,噬菌体和逆转录病毒 DNA重组本质上是一个酶促化学反应 重组的目的基因或DNA片段可以来源基因组DNA,cDNA和人工合成的DNA片段 从理论上而言，重组反应的最佳温度为25℃ DNA重组的方法有粘端连接法和平端连接法
形成重组DNA分子过程在细胞内进行 用DNA连接酶就可将目的基因和质粒形成重组质粒 DNA连接酶能够连接被限制性核酸内切酶断开的化学键 重组DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的检测与表达
黏性末端连接 平头末端连接 突出末端 DNA连接子技术 DNA适配子技术
选择一个适合的载体 限制性核酸内切酶在特异位点裂解质粒和目的基因 用连接酶连接载体 DNA和目的DNA，形成重组体 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌 重组体用融合法导入细胞
DNA聚合酶Ⅰ DNA连接酶 DNA修饰酶 DNA聚合酶Ⅱ
基因诊断 基因治疗 转基因和基因敲除 单克隆抗体制备 基因工程药物、疫苗和抗体
选择载体和获取目的基因 目的基因与载体酶切后连接 重组DNA导入受体细胞 筛选阳性克隆 分、切、接、转、筛
基因诊断 基因治疗 转基因和基因敲除 单克隆抗体制备 基因工程药物、疫苗和抗体
粘性末端与粘性末端的连接 平端与平端的连接 粘性末端与平端的连接 人工接头连接 同聚物加尾连接
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