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基因操作程序的第一步是基因表达载体的构建 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌的转化法 将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射法 检测目的基因的是否导入和转录均采用DNA分子的杂交技术
基因非编码区对于目的基因在块茎细胞中的表达是不可缺少的 从cDNA文库中获得的目的基因有内含子,没有启动子 目的基因可以通过农杆菌转化法导入受体细胞 用同一种限制酶,分别处理质粒和含目的基因的DNA,可产生相同的黏性未端进而形成重组DNA分子
检测目的基因是否翻译成蛋白质,可选用抗原—抗体杂交技术 将目的基因导入动物细胞通常采用显微注射技术 将目的基因导入植物细胞通常采用农杆菌转化法 E.coliDNA连接酶可以连接黏性末端和平末端
基因工程中标记基因都是抗药性基因 向农作物导入抗除草剂基因一般通采用农杆菌转化法 基因治疗是把病人的缺陷基因通过诱导修复,达到从基因水平治疗疾病的目的 大肠杆菌E.COLI的环状质粒是基因工程唯一的运载体
Ti质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因,是基因工程中重要的载体 用Ca2+处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法 含重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞,可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物 若能够在植物细胞中检测到抗虫基因,则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法 转基因动物的培育过程中受体细胞一般选择受精卵 显微注射技术是转基因微生物中采用最多的方法 基因枪法是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高
将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法 将目的基因导入小麦细胞内常用农杆菌转化法 将目的基因导入大肠杆菌内常用感受态细胞转化法 将目的基因导入老鼠细胞内常用显微注射法
利用PCR技术可以大量扩增目的基因 目的基因导人受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法 只能用一种限制酶分别切割运载体和目的基因,便于两者连接 利用运载体上标记基因的相关特性就可检测出目的基因已导入受体细胞并成功表达