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通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒的DNA DNA连接酶和运载体是构建重组质粒必需的工具酶 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器
通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒的DNA DNA连接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器
又称α-互补筛选 含有重组质粒的细菌形成白色菌落 含有重组质粒的细菌形成蓝色菌落 带有“空”质粒的细菌形成蓝色菌落 不含质粒的细菌不能生长
克隆该基因,测序,寻找其中是否含Mu序列 克隆该基因到质粒载体上,并转化其他细菌观察是否出现突变子 构建一个基因文库,并以Mu序列及lacDNA为探针,筛选文库,看两种探针是否与同一DNA片段杂交 以上方法都适用
抗药性筛选 分子杂交筛选 RNA反转录 免疫学方法 体外翻译
通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理质粒的DNA DNA连接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 质粒是广泛存在于细菌细胞质中的一种颗粒状的细胞器
抗药性筛选 分子杂交筛选 RNA反转录 免疫学方法 体外翻译
α互补筛选 插入失活筛选 杂交筛选 质粒的小量快速提取 DNA序列测定筛选
质粒的本质是DNA 质粒能自我复制 质粒是基因工程最常用的运载体 质粒仅存在于细菌体内
α互补筛选 插入失活筛选 杂交筛选 质粒的小量快速提取 DNA序列测定筛选
抗药性选择 分子杂交选择 RNA逆转录 免疫学方法 体外翻译
营养互补筛选 抗药性筛选 免疫化学筛选 原位杂交筛选 Southern印迹筛选