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特异性引物 模板DNA DNA聚合酶 dNTP DNA酶
反应体系中保持抗原过量 反应体系中保持抗体过量 反应体系中保持抗原抗体为最适比例 抗体特异性强 抗体亲和力强
DNA模板 NTP TaqDNA聚合酶 1对引物 Mg2+
DNA聚合酶 dNTP dNDP ddNTP ddNDP
提高Taq DNA聚合酶活性 稳定PCR反应体系 当dNTP的浓度为200 nmol/L时，MgCl2浓度一般为1.5 mmol/L较合适 在PCR中发挥作用的是结合Mg2+ Mg2+浓度过低使酶活力升高，还会使酶催化非特异性扩增
原位杂交 间接原位PCR 直接原位PCR Real-timePCR 点杂交
提高TaqDNA聚合酶活性 稳定PCR反应体系 当dNTP的浓度为200nmol/L时，MgCl2浓度一般为1.5mmol/L较合适 在PCR中发挥作用的是结合Mg2+ Mg2+浓度过低使酶活力升高，还会使酶催化非特异性扩增
模板DNA NTP 引物A、B Tag-DNA聚合酶 缓冲液
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 反应温度一般为37～40℃之间 反应体系必须加激活剂
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 反应温度一般为37~40℃之间 反应体系必须加激活剂
在同一条件下，对于一个可逆反应体系，当正反应速度大于逆反应速度时，此反应体系达到化学平衡 在同一条件下，对于一个可逆反应体系，当正反应速度小于逆反应速度时，此反应体系达到化学平衡 在同一条件下，对于一个可逆反应体系，当正反应速度等于逆反应速度时，此反应体系达到化学平衡
dNTP 模板DNA 特异性引物 TaqDNA聚合酶
100μl 50μl 30μl 20μl 60μl
DNA模板 TaqDNA聚合酶 一对引物 Mg
NTP
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓沖溶液 反应温度一般为37℃~40℃之间 反应体系必须加激活剂
提高TaqDNA聚合酶活性 稳定PCR反应体系 当dNTP的浓度为200nmol/L时，MgCl2浓度一般为1.5mmol/L较合适 在PCR中发挥作用的是结合Mg2+ Mg2+浓度过低使酶活力升高，还会使酶催化非特异性扩增
湘公网安备 43130202000226号