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以双脱氧底物取代正常底物 碱基与特殊染料间不同的相互作用 一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止 反应是DNA特异的,RNA不会干扰
Edman降解法 双脱氧链末端终止法 化学降解法 氧化-还原法 水解法
DNA聚合酶 dNTP dNDP ddNTP ddNDP
该法的测序载体不确定 该法的测序引物不确定 该法的DNA聚合酶不确定 该法的待测模板不确定 该法测定的序列是酶促反应生成的产物
碱基与特殊染料间不同的相互作用 一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止 限制性位点与DNA末端标记的相关性 可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序 反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支
dNTP 标记的dNTP ddNTP 标记的ddNTP dNTP与ddNTP
其基本原理是利用DNA的体外合成过程 反应体系中需加入dNTP和ddNTP ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中 dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止 生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段
Edman降解法 双脱氧链末端终止法 化学降解法 氧化-还原法 水解法
标记的dNTP ddNTP dNTP 标记的ddNTP dNTP与ddNTP