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使抗体与固相载体结合更加牢固 使抗原与抗体结合更加牢固 消除非特异性结合 为酶标抗体提供结合位点 使抗原与固相载体结合更加牢固
EMIT 双抗体夹心法 间接法 斑点-ELISA 竞争法
以硝酸纤维素膜为固相载体 底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色 测一份血清可同时获得针对多种抗原的抗体 根据斑点-ELISA原理可设计出多种检测模式 灵敏度高于常规ELISA
以硝酸纤维素膜为固相载体 底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色 测一份血清可同时获得针对多种抗原的抗体 根据斑点-ELISA原理可设计出多种检测模式 灵敏度低于常规ELISA
固相载体上包被的是抗原 固相载体上包被的是抗人IgM抗体 特异性抗原能有效去除非特异性IgG抗体 包被的抗人IgM抗体能去除待测物中的IgG抗体 显色颜色深浅与待测物成正比
应与抗体(抗原)有较高的结合容量,且结合稳定极少脱落 可结合抗原或抗体免疫反应物, 对亲和素或链霉亲和素等大分子蛋白可发生结合 生物分子固相化后仍保持活性,为有利于反应充分进行,最好其活性基团朝向反应溶液 方法应简单易行、快速经济
HRP 第二抗体和HRP 固相载体 抗原 抗原特异抗体
以硝酸纤维素膜为固相载体 底物经酶反应后形成有色沉淀,使固相膜染色 测一份血清可同时获得针对多种抗原的抗体 根据斑点-ELISA原理可设计出多种检测模式 灵敏度高于常规ELISA
与抗原或抗体有较高的结合容量且结合稳定 抗原或抗体与其结合后,应保持活性 固相化方法应简便易行,快速经济
ELISA 斑点ELISA 斑点免疫渗滤试验 酶免疫电转移印迹法 酶免疫组化技术
结合到固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫活性 酶标记抗原或抗体既保留了免疫活性,又保留了酶的活性 结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例 通过洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开 底物被固相载体上的酶催化变成有色产物,其定量与样品中待测物质含量成正相关
固相载体的选择 包被抗体或抗原的选择 酶标记抗体工作浓度的选择 实验环境的选择