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提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体结合→目的基因的检测与鉴定 目的基因的检测与鉴定→提取目的基因→目的基因与运载体结合→将目的基因导入受体细胞 提取目的基因→目的基因与运载体结合→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 目的基因与运载体结合→提取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
获取目的基因 选择与构建载体 目的基因与载体的拼接 载体基因DNA测序 筛选转化子
提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因与运载体的结合→目的基因的检测和表达 目的基因的检测和表达→提取目的基因→目的基因与运载体的结合→目的基因导入受体细胞 提取目的基因→目的基因与运载体的结合→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达 目的基因与运载体的结合→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和表达
载体将目的基因带入到受体细胞中,可自我复制或整合到受体DNA上 构建基因文库时,含不同插入片段的载体在受体菌中能够储存并克隆目的基因 携带目的基因的载体不必有遗传标记基因 能表达目的基因的载体必须有RNA聚合酶识别和结合的特定部位
载体用来携带目的基因或核酸序列进入受体细胞 载体根据功能不同可分为克隆载体和表达载体 载体不能在受体细胞中自主复制 载体中通常带有某些特定的药物抗性基因 载体中通常有一个由数个单一酶切位点组成的多克隆位点
基因表达载体上的标记基因不一定是抗生素抗性基因 基因表达载体的构建是基因工程的核心 基因表达载体中一定不含有起始密码子和终止密码子 基因表达载体的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶等特殊工具
需要限制酶和DNA连接酶参与 培育转基因动物不需要构建基因表达载体 通常用抗生素基因作为标记基因 基因表达载体的构建是基因工程的核心
基因传导载体 基因修饰载体 基因表达载体 基因转移载体 基因载体
需要限制酶和DNA连接酶参与 基因表达载体中含有启动子和内含子 通常用抗生素基因作为标记基因 基因表达载体的构建是基因工程的核心
基因传导载体 基因修饰载体 基因表达载体 基因转移载体 基因载体
构建“工程菌”时可用的运载体是质粒和噬菌体 培育转基因动物可用质粒、噬菌体、动植物病毒做运载体 培育转基因植物常用植物病毒和土壤农杆菌的质粒做运载体 运载体上常含有标记基因,便于筛选
基因表达载体的构建是基因工程的核心 基因表达载体的构建包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分 目的基因就是指编码蛋白质的结构基因 构建的基因表达载体都是相同的