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材料要新鲜并立即处理或及时冷藏 切片标本一般不宜固定 若为组织材料,一般不宜采用石蜡切片法 脱落细胞可采用直接涂片法 标本切片要求尽量薄
染色标本可长期保存而荧光不衰减 背景染色低,第一抗体可以高度稀释 敏感性差,需要标记每种抗体 敏感性高,不需标记每种抗体 以上说法不正确
在制作过程中尽量保持抗原完整性 切片尽量薄,以利抗原抗体接触和镜检 常见临床标本有组织、细胞、细菌 制片完毕后置室温下,自然风干后使用 标本中干扰抗原抗体反应的物质要充分洗涤
一部分荧光素未与蛋白结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去 抗体分子上标记的荧光素分子太多,荧光过于明亮而呈现非特异性染色 除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原,可与组织中特异性抗原以外之相应抗体结合 组织中难于提纯抗原性物质,制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以至容易混淆 抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合
F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越少 F/P值越高,说明细胞上结合的荧光素越多 固定标本的荧光抗体以F/P=2.5为宜 活细胞染色的荧光抗体以F/P=1.5为宜 (RB200)F/P=A515/A280
荧光免疫技术不宜作培养细胞染色 可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定量和定位 荧光免疫技术的主要步骤有标本制作;荧光抗体染色;荧光显微镜检查 标本的制作的好坏直接影响检测结果,是成功的关键步骤 组织材料可以制备成石蜡切片或冷冻切片
不需标记每种抗体 需要标记每种抗体 第一抗体可以高度稀释 染色标本可以长期保存而荧光不衰减 操作简单
荧光抗体直接加于标本上 常用于抗核抗体的检测 每检查一种抗原需制备特异的荧光抗体 灵敏度偏低 特异性高,非特异荧光染色因素少
荧光免疫技术不宜做培养细胞染色 可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定量和定位 其主要步骤为标本制作、荧光抗体染色、荧光显微镜检查 标本的制作直接影响检测结果,是成功的关键步骤 荧光免疫技术不宜做组织细胞染色
荧光抗体直接加于标本上 常用于抗核抗体的检测 每检查一种抗原需制备特异的荧光抗体 灵敏度偏低 特异性高,非特异荧光染色因素少
荧光免疫技术不宜作培养细胞染色 可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定量和定位 其主要步骤为标本制作、荧光抗体染色、荧光显微镜检查 标本的制作直接影响检测结果,是成功的关键步骤 荧光免疫技术不宜作组织细胞染色
荧光抗体染色 瑞氏染色 革兰染色 金胺O染色 抗酸染色
敏感性高,不需标记每种抗体 敏感性差 背景染色低,第一抗体可以高度稀释 染色标本可长期保存且荧光不衰减 需要标记每种抗体
革兰染色 墨汁染色 抗酸染色 免疫荧光抗体染色 镀银染色
荧光免疫技术不宜作培养细胞染色 可对标本切片中组织或细胞表面抗原进行定量和定位 其主要步骤为标本制作、荧光抗体染色、荧光显微镜检查 标本的制作直接影响检测结果,是成功的关键步骤 荧光免疫技术不宜作组织细胞染色
材料要新鲜并立即处理或及时冷藏 切片标本一般不宜固定 若为组织材料,一般不宜采用石蜡切片法 脱落细胞可采用直接涂片法 标本切片要求尽量薄
标本染色后应当天行内镜检查 镜下观察时间不宜太长 应用不发荧光的介质封片 在37℃时,观察效果更好 应在通风良好的暗室内进行观察