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人和大肠杆菌在合成胰岛素时,转录和翻译的场所是相同的
DNA连接酶能把两个黏性末端经碱基互补配对后留下的缝隙“缝合”
通过检测,大肠杆菌中没有胰岛素产生则可判断重组质粒未导入受体菌
人和大肠杆菌在合成胰岛素时,用于转录的模板链是相同的
线粒体和内质网 有氧呼吸所需酶 高尔基体和核糖体 内质网和高尔基体
人和大肠杆菌在合成胰岛素时,转录和翻译的场所是相同的 DNA连接酶能把两个粘性末端经碱基互补对后留下的缝隙“缝合” 通过检测,大肠杆菌中没有胰岛素产生则可判断重组质粒未导入受体菌 在培养大肠杆菌的工程菌过程中,获得目的基因工具酶有:限制性核酸内切酶,DNA聚合酶
用PCR扩增抗病毒基因 将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合,形成重组质粒 将重组质粒导入受体细胞 抗病毒基因的表达
容易鉴别 结构简单 形体微小 繁殖速度快,新陈代谢旺盛
内质网和高尔基体 有氧呼吸所需酶 高尔基体和核糖体 线粒体和内质网
用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并拼接 把重组后的DNA分子导入受体细胞内并进行扩增 检测重组DNA分子是否导入受体细胞内并表达出相应的性状 检测目的基因是否发生结构上的改变
目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 常用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因 在大肠杆菌中检测到人胰岛素基因转录出的mRNA 在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌 在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素
目的基因的检测 将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合,形成重组质粒 将重组质粒导入受体细胞 抗病毒基因的表达
用适当的酶对胰岛素基因和运载体进行切割并连接 把重组后的DNA分子导入受体细菌内进行扩增 检测重组DNA分子是否导入受体细菌内并表让出性状 通过紫外线照射,诱导大肠杆菌突变
在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因 在大肠杆菌中检测到人胰岛素基因转录出的mRNA 在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌 在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素
用限制酶对胰岛素基因与载体分别切割并催化两者连接 把重组后的DNA分子导入受体细菌内进行扩增 检测重组载体是否导入受体细菌内并表达出性状 筛选出能产生胰岛素的“工程菌”