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基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作载体 重组体DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组DNA进行纯化、筛选
获取目的基因 选择与构建载体 目的基因与载体的拼接 载体基因DNA测序 筛选转化子
化学合成法 筛选基因组DNA文库 筛选cDNA文库 聚合酶链反应
用统计方法进行筛选 用概率方法进行筛选 用传统方法进行筛选 用经验方法进行筛选
标志补救筛选 插入表达筛选 抗性筛选 限制性内切酶酶切图谱分析 核酸分子杂交筛选
化学合成法. 筛选基因组DNA文库 筛选cDNA文库 聚合酶链反应
化学合成法 筛选基因组DNA文库 筛选cDNA文库 聚合酶链反应 none
α互补筛选 插入失活筛选 杂交筛选 质粒的小量快速提取 DNA序列测定筛选
抗药性筛选 RNA反转录 免疫化学方法 体外翻译 PCR
抗药性标志选择 分子筛 Western印迹杂交 Northern印迹杂交 分子杂交
制备目的基因DNA片段 将目的基因与载体相连 将重组DNA导入受体细胞 筛选和鉴定DNA重组体 去除载体
目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 用人工合成的方法获取的目的基因能够直接用于基因的扩增和表达 运载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
化学合成法 聚合酶链式反应 筛选cDNA文库 筛选基因组文库 DNA合成仪合成
重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来 单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第一次筛选的目的是从不同种类的细胞中筛选出杂交瘤细胞 单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第二次筛选的目的是筛选出针对目标抗原的抗体为阳性的杂交瘤细胞 基因工程中用不同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因,酶切产物用DNA连接酶连接,将获得的产物直接导入受体细胞
α互补筛选 插入失活筛选 杂交筛选 质粒的小量快速提取 DNA序列测定筛选
用统计方法进行筛选 用概率方法进行筛选 用传统方法进行筛选 用经验方法进行筛选 用问卷调查方法进行筛选
基因工程也称基因克隆 只有质粒 DNA可作为载体 重组体 DNA转化或转染宿主细胞 需获得目的基因 需对重组 DNA进行纯化.筛选