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测定波长范围不只局限在可见不区,还可扩展到紫外区 不需停止酶反应就可直接测定产物生成量 能测定反应体系的pH变化 比荧光法灵敏度高 不需做标准曲线
反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、EI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、EI、ESI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、ESI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)形式存在 反应体系中的酶(E)以EI、ESI形式存在
其催化活性在酶体系中最低 常为酶体系中间反应的酶 多催化可逆反应 该酶活性调节不改变整个反应体系的反应速度 关键酶均受共价修饰调节
底物浓度与酶促反应速度呈直线函数关系 温育时间必须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 温血动物组织中酶的最适温度多在35~40℃之间 pH为中性
其催化活性在酶体系中最低 常为酶体系中间反应的酶 多催化可逆反应 该酶活性调节不改变整个反应体系的反应速度 反应体系起始物常可调节关键酶
底物浓度与酶促反应速度呈直线函数关系 温育时间必须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 在0~40℃范围内,反应速度随温度升高而加快 pH为中性
反应时间必须在120min以上 在0℃~40℃范围内,反应速度随温度升高而加快 底物浓度与酶促反应速度呈直线函数关系 反应体系中不应该用缓冲溶液 pH值为中性
作用物的浓度愈高愈好 应选择该酶作用的最适pH 反应温度宜接近最适温度 合适的温育时间 有的酶需要加入激活剂
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 反应温度一般为37~40℃之间 反应体系必须加激活剂
作用物的浓度越高越好 应选择该酶的最适pH 反应温度应接近最适温度 有的酶需要加入激活剂 缓冲剂的选择十分重要
作用物的浓度愈高愈好 应选择该酶作用的最适pH 反应温度宜接近最适温度 合适的温育时间 有的酶需要加入激活剂(10/1994)
底物浓度与酶促反应速度呈直线函数关系 温育时间必须在120分钟以上 反映体系中不应该用缓冲溶液 在0~40℃范围内,反应速度虽温度升高而加快 PH值为中性
作用物的浓度越高越好 应选择该酶作用的最适pH 反应温度宜接近最适温度 合适的温育时间 有的酶需要加入激活剂
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓冲溶液 反应温度一般为37~40℃之间 反应体系必须加激活剂
反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、EI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、EI、ESI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)、ESI形式存在 反应体系中的酶(E)以E、ES(底物)形式存在 反应体系中的酶(E)以EI、ESI形式存在
340nm 450nm 500nm 560nm 620nm
底物浓度达到Km即可 反应时间须在120分钟以上 反应体系中不应该用缓沖溶液 反应温度一般为37℃~40℃之间 反应体系必须加激活剂